外泌体作为机体天然信息传递的载体,在细胞间的通信中发挥着重要作用。蛋白质是外泌体的重要组成成分,因此,分析外泌体的蛋白质组成对于推动外泌体功能的研究极为重要。目前,质谱技术的蛋白质组学为外泌体蛋白质组成的研究提供了强有力的技术支持。全面研究外泌体的蛋白质有助于深入理解外泌体及其蛋白质在生命活动中的作用,此外,还能帮助识别与疾病相关的蛋白质,这些蛋白质可作为疾病早期诊断和预后评估的生物标志物。
在这一领域,俄罗斯专享会284为您提供先进的外泌体非标记定量蛋白组学(DIA、Labelfree)和同位素标记定量蛋白组学(SILAC、iTRAQ、TMT)服务。现今,iTRAQ(isobaric tagging for multiplexed relative and absolute protein quantitation)和TMT(tandem mass tag)是最为广泛应用的蛋白质定量方法之一。这两种方法的原理相似,均采取化学体外标记的方式,能够检测低丰度的蛋白、胞外蛋白、膜蛋白、胞浆蛋白及核蛋白等,并可同时处理多个样本,确保定量结果的准确性。在比较蛋白组分析及鉴定差异蛋白方面,均表现出良好的效果。
SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino Acids In Cell Culture)的基本原理则是通过培养细胞,利用天然同位素或稳定同位素替代相应的氨基酸。经过有效的传代,稳定同位素会完全掺入新合成的蛋白质中。在对不同标记的细胞或蛋白等比例混合后,便可利用质谱进行鉴定。如果峰值的比例为1:1,则说明该蛋白的含量无差异;如果含有重型氨基酸的峰值偏高,则说明该组中此蛋白的含量更高。SILAC技术以其高效的蛋白标记能力和对低水平蛋白含量变化的敏感性,受到广泛欢迎。
在非标记定量(Labelfree)蛋白质组学中,利用液质联用技术将蛋白质酶解为多肽后再进行质谱分析,依据蛋白肽段的鉴定数量和色谱峰面积实现相对定量。Labelfree的优点包括不需要昂贵的标签作为内标,且样本制作过程简单。然而,相较于标记定量,这种方法在数据分析上更加复杂,对仪器的稳定性和重复性有着更高的要求。通过在样本中添加已知含量的标准蛋白,还可以实现绝对定量。
DIA(Data Independent Acquisition)是近年来备受关注的一种质谱采集技术,属于非标记技术。其原理是在质谱数据采集时,通过高速、循环地全扫描每个采集窗口内的所有母离子及其碎裂后的子离子。这种方法相较于传统的Labelfree技术,最大的优势在于能够高效测定复杂样品中相对低丰度的蛋白分子,显著提高定量分析的可信度。
在服务流程方面,客户可以提供血清、血浆、脑脊液、尿液、胸水、腹水、唾液等生物流体样本,或者细胞上清、植物样本及其他特殊样本,亦可直接提供已经提取好的外泌体。根据后续研究目的和方法,生物流体样本类型需遵循相应的前处理要求。
关于俄罗斯专享会284,本公司是一家致力于通过质谱技术开发外泌体精确诊疗产品的创新型生物科技公司。至今,我们成功开发了多个关键平台,包括血液循环蛋白(游离蛋白&外泌体蛋白)标志物发现和诊断技术平台,实现功能性外泌体原料的规模化生产与纯化。此外,我们的产品涵盖外泌体科研产品、功能性外泌体原料及蛋白组学产品,现有货架产品已超过50种,深入涵盖外泌体检测、保存及递送等多个方面。
我们的企业荣誉包括获得国家科技中小型企业认证,江苏省民营科技企业称号,以及省科创大赛优秀企业的殊荣。我们已申请7项国家发明专利,1项PCT专利,并获批4项实用新型专利。我们的研究成果还在多家知名期刊发文,如Molecular Therapy、Journal of Controlled Release和Advanced Healthcare Materials等。