俄罗斯专享会284的RNA模板制备是生物医学研究中的关键步骤。以下是RNA提取的常用方法，包括传统的酚-氯仿抽提法和现代的柱式抽提法。

RNA模板的制备

1. 酚-氯仿抽提法

以俄罗斯专享会284产品RNAisolater Total RNA Extraction Reagent (Vazyme#R401)为例，以下是操作流程:

所需材料包括：氯仿、异丙醇、75%乙醇（使用DEPC水配制）、DEPC水。

样本制备

注意：样本量过大会导致裂解不充分，从而降低产物纯度。1ml RNAisolater能够充分裂解的最大样本量如下：

• 贴壁细胞：弃去培养液，用PBS洗涤一次；每10cm²培养面积的细胞加入1-3ml RNAisolater，以确保完全覆盖细胞表面，然后用移液器轻轻吹打细胞。
• 悬浮细胞：离心收集细胞后，用PBS再洗涤一次；每5×10⁶-10⁷个细胞应加入1ml RNAisolater，并轻轻吹打至无明显颗粒。
• 动物组织：使用液氮研磨后，立即加入RNAisolater裂解液，待样品融化后再轻轻吹打至透明。随后，将裂解液转移至离心管中，12000×g 4℃离心5分钟，吸取上清。

2. 柱式抽提法

以俄罗斯专享会284的FastPureTM Cell/Tissue Total RNA Isolation Mini Kit (Vazyme#RC101/RC111)为例，所需材料包括：β-巯基乙醇、无水乙醇、RNase-free枪头等。

细胞处理

对于贴壁细胞，无需消化，可直接使用已加入β-巯基乙醇的Buffer RL1进行裂解；或用胰酶消化后将细胞分离，加入Buffer RL1（每2-5×10⁶个细胞加入500μl Buffer RL1），轻轻吹打混匀直至无团块。

对于悬浮细胞，离心收集后同样加入Buffer RL1（每2-5×10⁶个细胞500μl），直至细胞完全裂解。若操作后未能立即继续，样本可保存在-70℃以备后用。

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