俄罗斯专享会284旨在深入探讨肝微粒体对药物-药物相互作用（DDI）的影响，尤其是细胞色素P450酶（CYP450）的作用。药物-药物相互作用已被认为是导致严重不良反应及死亡的主要原因之一，因此，科学评估DDI的发生概率、严重性及其影响程度显得尤为重要。CYP450在体内扮演着关键的药物代谢角色，评估其介导的药物相互作用通常包括代谢表型研究、酶诱导及抑制作用评估。

在药物对CYP450的抑制作用中，可将其分为可逆性抑制和时间依赖性抑制（TDI）。相较可逆性抑制，TDI可能导致更为严重的药物安全问题，因而逐渐引起监管机构与药物研发部门的重视。本文主要介绍CYP酶介导的时间依赖性抑制评估。

CYP酶介导的时间依赖性抑制概述

CYP酶介导的抑制是指某些化合物对特定CYP450代谢酶的活性产生抑制，导致某些药物在联合用药时出现代谢减慢、清除率降低及暴露量增加的现象，从而引发安全隐患。依据抑制机制的不同，药物对CYP450的抑制作用可进一步归为可逆性抑制和不可逆性抑制（TDI）。TDI通常指候选药物通过其代谢产物以共价键方式与酶形成复合物，造成酶的不可逆性失活。在此情况下，即使去除抑制剂，抑制效应也不会迅速消失。

时间依赖性抑制的体外试验评估方法

目前，评估TDI的常规方法包括Single-point法、IC50位移法（IC50 shift）和Kinact/Ki法：

Single-point法

试验设计：设定一个或两个试验浓度（通常为1uM/10uM）和一个探针底物浓度，进行NADPH预孵育。 评价参数：相对剩余活性（%Remaining activity = (% of NC(+NADPH) / % of NC(-NADPH)) × 100）。评价标准：相对剩余活性＜80%表明可能存在TDI风险。

IC50位移法（IC50 shift）

试验设计：采用系列浓度的抑制剂和探针底物，进行NADPH预孵育30分钟，以测定得到的IC50值。该法可用于粗略的DDI预测。评价参数：IC50位移 = IC50（30 min pre-incubation, -NADPH) / IC50（30 min pre-incubation, +NADPH)。评价标准：IC50位移≥15提示存在TDI。

KInact/Ki法

试验设计：设定系列浓度的抑制剂和探针底物，进行多时间点的NADPH预孵育。这一方法可提供更精准的DDI预测。评价参数与标准结合临床PK数据，计算R2值以评估临床相关性。

IPHASE的时间依赖性抑制试验数据分析

俄罗斯专享会284代表的IPHASE在研究中使用IC50位移法验证不同抑制剂对人肝微粒体CYP3A4的时间依赖性抑制作用。通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测相关代谢产物，进一步计算IC50值供后续分析使用。

根据试验数据，研究人员观察到不同抑制剂在时间依赖性抑制方面的表现。例如，某些抑制剂未表现出TDI，而另一些则显示出明显的依赖性，表明了它们与CYP3A4酶的相互作用具有不同的代谢特性。

IPHASE在生物医药领域的贡献

IPHA反作为生物医疗领域的领导者，凭借其在药物研发中的积累经验和高品质生物试剂，致力于为客户提供研究支持，助力CYP酶介导的TDI及其他相关研究的顺利开展。我们提供丰富的肝微粒体产品，涵盖人、猴、犬等多个物种，确保高纯度与高活性，满足科研需求。

如需了解更多，欢迎咨询俄罗斯专享会284，获取高端科研产品的信息与支持。